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冻存的细胞该如何开始培养?

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发布时间:2020/7/23 11:07:46

⑴将一管细胞从液氮罐中取出,注意保护手和眼睛。

  ⑵用10秒钟时间将小管的盖子拧松1/4以去除残留在螺纹处的液氮,然后将盖子盖紧。

  ⑶将小管放入37℃水浴中,轻轻握住并旋转,直到管内物体完全融化。

  ⑷将小管立即从水浴中拿出,擦干,转入无菌环境。

  ⑸用70%的酒精冲洗小管,然后擦去多余酒精。

  ⑹打开盖子,注意手指不要碰到里面的螺纹。用1ml离心管离心内容物。

  ⑺平衡管内物,用多聚赖氨酸包被培养瓶(多数细胞用T-75的培养瓶)。多数细胞类型推荐接种密度为每平方厘米5000细胞。

  ⑻盖好盖子,轻轻摇晃培养瓶以使细胞分布均匀。若需要气体交换可打开盖子。

  ⑼将培养瓶放放培养箱中(37℃,5%CO2,95%空气)

  ⑽植入培养后第6-16小时更换一次培养基以去除残留的二甲基亚枫和未贴壁的细胞。


生物试剂的使用常识:

(1)试剂切忌与手接触(有些试剂有强腐蚀性、等特性)。

(2)要用洁净的药勺,量筒或滴管取用试剂,绝对不允许用同一种工具同时连续取用多种试剂。取完一种试剂后,应将工具洗净(药勺要擦干)后,才可取用另一种试剂。

(3)试剂取用后一定要将瓶塞盖紧,不可放错瓶盖和滴管,绝不允许张冠李戴,用完后请及时将瓶放回原处,以免遗忘,带来不便。

(4)已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内(怕产生原试剂的再次污染)。

处理提示:

1、购买后,请务必确认标签上的注意事项。

2、做好预防颠倒,摔坏的措施和管理体制。

3、在使用前再次确认标签上的注意事项。做好必要的安全对策。

4、对没有标明其危险特性,有害特性的,也要慎重地进行操作。

5、必须戴好防护用具,小心翼翼进行操作。

6、请参照相关法规,文献,MSDS等信息,理解并掌握好试剂的特性,再进行安全操作。

7、通常购买试剂时要想到一次性用完。若估算不足有剩余的话,要更加注意其保管和管理。

8、万一试剂操作者并非专业技术人员。必须在专业人士的指导监督下进行操作。

9、对于使用后的废弃物,不要或旧的试剂,应按照相关法律法规正当处理。

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